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支架多孔论文范文

1.主要实验设备及试剂
1.1主要设备
1.2主要试剂
2.方法
2.1多孔BC-PLGA复合支架制备
2.2复合支架相关理化性能分析
2.2.1表面形貌观察多孔BC- PLGA复合支架表面喷金处理后扫描电镜下观察.
2.3多孔BC-PLGA复合支架体外生物相容性分析
2.4统计学分析
3.结果
3.1复合支架相关理化性能分析
3.2多孔BC-PLGA复合支架体外生物相容性分析
4.讨论
硅胶多孔支架:双孔M3模内攻牙显示器支架13902698458 周海勇

PREPARATION AND PROPERTIES OF POROUS BACTERIAL CELLULOSE-POLY LACTIC-CO-GLYCOLIC ACID COMPOSITE SCAFFOLDS

YAO Zhiwen, LI Hongjiu, LIU Wei, et al

【摘要】目的

制备多孔细菌纤维素（Bacterial Cellulose,BC）-聚乳酸乙醇酸(Poly Lactic-co-glycolic acid,PLGA)复合支架及研究其相关性能.方法溶液浇铸／粒子沥滤技术制备多孔BC-PLGA复合支架并检测相关理化性能（抗张强度、断裂伸长率、吸水率和孔隙率）.然后接种成骨样细胞MG-63体外培养,通过扫描电镜(SEM)观测细胞生长状况；四论文范文偶氮唑盐比色法(M论文范文)分析支架浸提液毒性.结果多孔BC-PLGA支架抗拉强度为（98536±09155）N/mm2,伸长率为（59616±8151）%,孔隙率为（6511±572）%,吸水率为（6942±513）%；扫描电镜和M论文范文法检测结果显示支架无细胞毒性,对MG-63细胞具有良好的亲和性及增殖活性. 结论多孔BC-PLGA复合支架具备良好的理化性能和生物相容性,有望用作组织工程支架材料.

【关键词】多孔细菌纤维素聚乳酸乙醇酸性能

【Abstract】ObjectiveTo prepare porous Bacterial Cellulose(BC)-Poly lactic-co-glycolic acid(PLGA) composite Scaffolds and study their properties.

MethodsThe porous BC-PLGA composite scaffolds were prepared by solvent casting／particulate leaching method．And it′s mechanical property(tensile strength,elongation,porosity and water absorption rate) was measured．Osteoblasts(MG-63) was cultured on it and observed by SEM. M论文范文 test was also done to assess it′s cytotoxicity.

ResultsThe porous BC-PLGA composite scaffolds had good mechanical property:（9853 6±0915 5）N/mm2 tensile strength,（59616±8151）% elongation,（6511±572）% porosity and（6942±513）% water absorption rate. The SEM-scanning and M论文范文 test showed that the composite scaffolds had no cytotoxic effect, and exhibited good affinity and proliferation to MG-63.

ConclusionThe porous BC-PLGA composite scaffolds h论文范文e good mechanical property and biocompatibility, so it has the potential properties for the application in tissue-engineering.

【Key words】Porosity, Bacterial cellulose, Polylactic-co-glycolic-acid, Properties

【Author′s address】The affiliated Shajing Hospital of Guangzhou medical college, Shengzhen City, Guangdong Province 518104, PRC

doi:10.3969/j.issn.1671-332X.2012.6.005

理想的组织工程材料要求具有良好的生物相容性、适合的孔径大小和一定的机械强度［1］,目前单一的生物材料往往不能同时满足这些要求,但不同材料之间的复合可成为解决这一问题的一种方法,基于这个思路,本课题选用理化性能论文范文的具有纳米级纤维结构的细菌纤维素(Bacterial Cellulose,BC)和生物相容性良好的聚乳酸乙醇酸(Poly Lactic-co-glycolic acid,PLGA)通过溶剂浇铸/粒子浸出法［2］制备多孔BC-PLGA复合支架,通过对相关理化性能的分析以及体外MG-63细胞培养,初步评价其在组织工程中的应用可行性.

1.主要实验设备及试剂

1.1主要设备

电热恒温鼓风干燥箱,LDZ5-2台式离心机,CO2培养箱,YJ-1450型超净工作台,HTS7000plus多孔板紫外/荧光/可见光高效分析仪,倒置相差显微照相系统,J论文范文-6360LV电子显微镜.

1.2主要试剂

成骨样细胞MG-63（四川大学口腔疾病国家重点实验室）,高糖DMEM培养基,胰蛋白酶,乙二胺四乙酸,四论文范文偶氮唑盐(M论文范文),二论文范文亚砜,胎牛血清.

2.方法

2.1多孔BC-PLGA复合支架制备

参考文献［3］制备多孔BC-PLGA复合支架,25 kGy60Co照射24 h消毒灭菌后4 ℃保存备用.

2.2复合支架相关理化性能分析

2.2.1表面形貌观察多孔BC- PLGA复合支架表面喷金处理后扫描电镜下观察.

2.2.2力学性能的测试多孔BC-PLGA复合支架裁剪成一定的形状,用千分尺测其厚度和宽度.按以下公式计算复合支架的抗张强度(δb)、断裂伸长率(εb): δb＝F/A,εb＝(I－I0) ×100%（注:F,支架的最大拉力,A,支架的截面面积,I,支架的最长延伸长度,I0,支架的初始长度）.

2.2.3孔隙结构测定采用压汞法测定支架孔隙率［4］,首先测定支架体积后抽真空,将汞充至多孔支架周围,再从外部对汞加压,记录压力和加压过程中进入孔中汞的体积,孔隙率即为：进入孔中汞的体积/多孔材料的体积.

2.2.4吸水性测定多孔BC-PLGA复合支架裁剪成1 cm×1 cm的样品称重(W1),然后浸入盛有蒸馏水的杯中24 h,取出后滤纸吸干表面的水分称质量,重复此操作直至支架恒重(W2),根据以下公式计算膜的吸水率Q:Q等于(W2－W1)/W2×100%,8个样本,每个样本测3次,取其平均值.

2.3多孔BC-PLGA复合支架体外生物相容性分析

2.3.1MG-63细胞在支架表面的形态学观察将MG-63细胞冻存管复苏后按操作规范培养换液,倒置相差显微镜下观察生长状态良好的第二代MG-63细胞计数以1×105/ml浓度接种多孔BC-PLGA复合支架,置于37 ℃、5%CO2恒温培养箱中进行培养.接种5天后取出标本,弃上清,用PBS液浸洗,25%戊二醛固定液中4 ℃固定过夜.酒精梯度脱水15 min 2次,样本表面喷金后电镜扫描观察.

2.3.2M论文范文法检测支架浸提液对细胞的毒性将多孔BC-PLGA复合支架分别用DMEM和胎牛血清配成含体积分数为10％胎牛血清的25％、50％及100％浓度的浸提液.将200 μl浓度为1．5×107/L的MG-63细胞种植到96孔板上,待细胞贴壁后分别与25％、50％及100％浓度的浸提液以及作对照的DMEM培养.于培养1、4、7 d后每孔内加入M论文范文(5 g/L) 100 μL,37 ℃下培养4 h后,加入150 μl二论文范文亚砜(DMSO)加入每孔,振荡8 min,酶联免疫检测仪在490 nm处测定吸光度值.

2.3.3细胞毒性评价对材料生物相容性评价参考中华人民共和国国家标准［5］,根据公式计算细胞相对增值率RGR(Relative Growth Rate)等于(实验组OD均值/空白对照组OD均值)×100%；RGR≥100为0级, 75～99为l级,50～74为2级,49以下为3~5级.其中0~*为合格,2级需结合细胞形态综合评价,3~5级为不合格.

2.4统计学分析

采用SPSS 130 统计软件包,对实验所得数据采用重复测量数据方差分析法,各组间多重比较采用LSD-t检验,p<,005为差异有统计学意义.

3.结果

3.1复合支架相关理化性能分析

表面形态分析：支架的表面及其深部可见大量圆孔状结构,并在内部通过小孔相互贯通,孔的大小约20~200 μm不等,孔形状不规则,边缘锐利.见图1.多孔BC-PLGA复合支架物理性能的测试：多孔BC-PLGA复合支架显示出良好的理化性能.见表1.

3.2多孔BC-PLGA复合支架体外生物相容性分析

3.2.1MG-63在支架表面的形态学观察如图2示,经过5天培养,细胞在支架表面已开始增殖,细胞呈片状或球状紧密贴附于支架壁的表面,活性良好,部分细胞有伪足驻于材料表面.

3.2.2支架材料浸提液毒性分析培养过程中,MG-63细胞在不同浓度的支架浸提液及对照DMEM培养液中生长良好,不同时间段测得的OD值绘制细胞生长曲线图见图3.各实验组不同时间点的OD值进行两两比较,差异均无显著性意义(p>,005),提示多孔BC-PLGA支架材料无明显细胞毒性.根据M论文范文实验数据计算出RGR值≥100,细胞毒性为0级,表明多孔BC-PLGA支架材料符合国家标准GB／T16886-1997中的要求,未见细胞毒性.

4.讨论

在组织工程中,生物支架起到支撑和模板作用,是细胞附着的基本框架和代谢场所,支架［6］孔结构形状、尺寸大小和孔隙率对细胞的粘附、增殖和分化有着很重要的影响,一般认为较高的孔隙率有利于细胞的种植生长、营养物质的传输以及血管和神经的内生长, BUCHOLZ［7］认为支架材料的孔径不宜<,100 μm,否则细胞则不易进入支架材料中,同时也不利于新生血管生长和骨组织的长入；但过大的孔径(>, 500 μm)容易让细胞从过大的孔隙流走,难保留在支架中,而且孔径越大孔隙率越高,材料强度会越低.FREYMAN［6］等认为孔的尺寸一般为100~200 μm,且相互贯穿的孔形态会更有利于细胞的生长.

硅胶多孔支架:双孔M3模内攻牙显示器支架13902698458 周海勇

本课题选用造孔剂的粒径范围为100~200 μm,扫描电镜观察制备的多孔BC-PLGA复合支架呈多孔状结构,孔的大小约20~200μm不等,底部有小孔相互贯通,其中出现部分较小孔径原因可能为所用造孔剂在筛选时混杂有小部分更小孔径的造孔剂所造成.

　　生物材料物理性能主要包括材料的力学性能和亲水性等方面指标.力学性能可以从拉伸率和抗拉强度两个方面来检测.亲水性检测主要有吸水率和孔隙率两个指标,通常吸水率和孔隙率越高,材料的生物相容性就越高,但相应强度会降低.为了较好地解决生物材料高孔隙率和低强度这一矛盾,本课题选用力学性能优良的BC和生物相容性良好的PLGA复合制作多孔支架,BC是由木醋杆菌(A.xylinum)分泌的一类纤维素物质,本身有许多独特的性质［8］：①具有厚度为3~8 nm纳米级超细纤维,是目前最细的天然纤维,②高抗张强度和弹性模量：扬氏模量高达15×1010 Pa,是一般植物纤维的数倍至十倍以上, ③高亲水性：能吸收60~700倍于其干重的水份.

本课题所制备的多孔BC-PLGA复合支架孔隙率为6511%,吸水率为6942%,伸长率59616%,抗拉强度98536 N/mm2,同时具有较高的力学强度和孔隙率,支架力学强度主要来源与细菌纤维素本身的优良物理机械性能,另外与制作支架时PLGA溶液渗透入细菌纤维素内部立体网状结构并与其牢固结合有关,使其能在保持较高的形变能力同时具有较好的亲水性.因此有望用作修复人体功能和负荷区生物材料.

体外细胞毒性试验是评价材料生物相容性的重要指标.目前学者多倾向于从生物材料对细胞的附着、生长、增殖及代谢功能的影响来评价材料生物相容性和细胞毒性.M论文范文比色法［9］是其中的一种较为常用的方法.本实验MG-63细胞在所制备的支架浸提液中生长良好,M论文范文检测结果提示支架无细胞毒性,结合细胞在复合支架生长的扫描电镜观察,可认为制备的多孔BC-PLGA复合支架具有良好的生物相容性.

综上所述,采用溶剂浇铸/粒子浸出法制备的多孔BC-PLGA复合支架同时具有较高的力学性能和孔隙率,生物相容性良好,为组织工程生物支架材料提供了一种新的尝试和选择.

实验在支架的制备和性能方面进行了初步的探讨,有关复合支架更多性能,支架在体内降解及在体内生物相容性的评估,还需要进一步实验观察.

参考文献

［1］SCO论文范文 J,HOLLISTER.Porous scaffold design for tissue engineering［J］.Nature Materials,2005,4(7):518-524.

［2］MIKOS A G,SAR*INOS G,VACANTI J P,et al. Biocompatible Polymer Membranes and methods of preparation of three dimensional membrane structures［J］.US5514378,1996.

［3］姚志文.多孔细菌纤维素-聚乳酸乙醇酸-羟基磷灰石复合支架的制备及性能研究［J］.中国医药导报,2012,9(9):101-104.

［4］NE论文范文LES D L,ELDER S H,GIBERT J A.Potential use of chitosan as a cell scaffold material for cartilage tissue engineering［J］.Tissue Eng,2002,8(6):1009-1016.

［5］GB/T 16886.11-1997.医疗器械生物学评价［S］.

［6］FREYMAN T M,YANNAS I V,GIBSON L G. Cellular materials as porous scaffolds for tissue engineering［J］. Progress in materials science,2001,46:273-282.

［7］BUCHOLZ R W.Nonallograft osteoconductive bone graft substitutes［J］.Clin Orthop Relat Res,2002,395:44-52.

［8］MAGDALENA ZABOROWSKAA,AASE BODINA,HENRIK BCKDAHL,et al. Microporous bacterial cellulose as a potential scaffold for bone regeneration［J］. Acta Biomaterialia,2010,6(7):2540-2547.

［9］韩立薇,罗喜平,赵秋生,等.槲皮素联合顺铂诱导宫颈HeLa细胞凋亡的实验研究［J］.现代医院,2011,11(11):15-17.

总结：本论文是一篇免费优秀的关于支架多孔论文范文资料，可用于相关论文写作参考。

硅胶多孔支架引用文献: