有关拮抗疫病芽孢杆菌对辣椒的控病诱导抗性毕业论文写作资料-论文写作网

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辣椒疫病论文范文

辣椒疫病是引起的一种毁灭性上传病害·可造成幼苗猝倒、成株期茎杆枯死、叶片脱落及果实腐烂．该病不仪可以通过雨水或灌溉水存土壤中传播,引起大面积死苗,也可以通过气流传播,短期内爆发成灾．带来巨大的经济损失[1-3]．近年来随着辣椒产业化的发展·种植面积的增加,辣椒疫病的发生有逐年加重的趋势．生产中目前尚无理想的抗病品种,病害的防治主要采用化学防治为主要防治于段,辣椒是食用经济作物,对其外观和内在质量有特殊的要求,农药残留、病原菌抗药性以及对食品卫生的影响·限制了农药的大规模利用,由于该病害发生多从侵染根部开始,地上部分表现症状时,再用化学方法防治呵能达不到应有的效果[4-5],为了寻找涑椒疫病的最佳控制途径,满足绿色农业发展的需要·探索该病的生物防治势在必行．周内外利川拈抗微生物来防治辣椒疫病已有报道[6-9],但到目前为止,能用米防治辣椒疫病的生防菌或生防制剂均处于试验阶段,因此,进一步加大生防制剂的研制开发力度,建立和完善与之配套的施用技术体系．对于实现辣椒疫病的安全、有效治理具有十分重要的意义．本实验室在前期的实验中从辣椒根际土壤中分离获得了大量的芽孢菌株,并从中筛选山对辣椒疫霉菌有显著拮抗作用的菌株．进一步探讨了其对辣椒疫病的控制和对寄主体内与抗性有关的多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(P()D)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的诱导情况．1 材料与方法l.1 供试材料

(l)供试品种

辣椒品种为新苏椒5号．重庆市植金种业有限公司提供．采用温室营养钵（口径7.5CM）单株育苗,幼苗培养至5～6片真叶备用,在接种3一4天前取出营养钵置于托盘,使营养钵内介质干燥．

(2)供试菌株

辣椒疫霉菌山中国农业科学院蔬菜花卉研究所提供·生防芽孢菌株Bn-130由前期实验筛选获得,保存备用.1.2试验方法1. 2.1 拮抗茵对辣椒疫病的控病测试

拮抗菌的准备：将在牛肉膏蛋白胨培养基(NA)斜面上活化的Bn-130菌株接入装有90mLNBNA中未加琼脂）培养液中·置28～30~C,180 r/min摇床上培养72 h,收集菌液,每株辣椒笛灌上述菌液5ML每个处理l5株辣椒苗,重复3次,设无菌水和NB培养液处理为对照．上述处理2.4,6.8 d后灌根接种病原菌．

病原菌接种：将辣椒疫霉菌块置于(&,acute,AA培养基,平板上,25~28~C,光照培养9～10天后,培养皿中加入适量无菌水,用消毒的毛笔将孢子囊洗脱．放人4.0℃冰箱中预冷30MIN,促使游动孢子从孢子囊中释放出来,用血球计数板计算游动孢子的数量,调节至l000个/ML,距植株基部lcm处打一小孔,注入2ML,上述孢子悬浮液,接种后将营养钵灌透水．保持基质湿润,气温控制在24-26~C．接种后第8天统计发病严重度和病情指数,病原菌灌根接种的发病严重度分级标准参照《中国辣椒》.1.2.2拮抗菌对辣椒的诱导抗性

每株辣椒苗用I二述处理的Bn-130菌悬液jml.灌根,以无菌水和NB培养液处理为对照,每处理10株辣椒苗．3次重复．分别于第2.4,6.8d在UV-8500紫外可见分光光度计上测定辣椒植株体内多盼氧化酶(PP())、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性．

(1)PPO的提取、活性测定

参照李靖等[3]的方法,取0. 2 g茎段加入2ML．0.05 mol/L,PH 6.8磷酸盐缓冲液和少量石英砂,冰浴研磨．1 5 000 r/MIN冷冻离心20 min,取上清液．在小试管中依次加入0.02MOL/L邻苯二酚溶液1.5ML,0.05 mol/L．pH 6.8磷酸盐缓冲液1.5 niL．酶液0.1ml.:另一小试管加前两种溶液,不加酶液作为对照,在30℃下反应2 min．398 nm波长下测吸光值(OD值）．

(2)POD的提取、活性测定

参照张欣等[14]的方法,取0.2 g茎段加入2 nll,．0.05MOL/L,PH 6.8磷酸盐缓冲液和少量石英砂,冰浴研磨．1500r/min冷冻离心20rrun．取上清液．在小试管中依次加入0.02 mol.L愈创木酚1ML（现配现用）,0.05 MOL/L　pH 6.8磷酸盐缓冲液1.5 nl.,酶液0.1ML．2%过氧化氢0.5ML,而对照为将过氧化氧溶液改为0.5mL蒸馏水．从加入H2O2那一时刻开始计时5MIN时任470nm波长下测OD值．

(3) PAL的提取、活性测定

参照李合生[15]的方法·取茎段5.0g．加10 mL,5 mol/L．pH 8.8巯基乙醇硼酸缓冲液、0.5 g聚乙烯吡咯烷酮( PVP)、少量石英砂,冰浴研磨．4层纱布过滤．10000 rmin离心15 min,取上清液lmL加l ml．0.02 mol/L苯丙氨酸．2mL蒸馏水,总体积为4 rnL.对照不加底物,多加1mL蒸馏水,反应液置恒温水浴30~C中保温．0.5h后在290 nm处测定()D值．1.2.3数据分析

试验数据均采用SPSS10.O软件进行邓肯氏新复极差法分析．2 结果与分析2.1 生防芽孢杆菌Bn-130对辣椒疫病的防治效果（表1）

从表l可见,芽孢杆菌Bn-130菌液处理辣椒幼苗8 d内,接种疫霉菌,植株发病率和病情指数与对照相比均降低,温室控病测试处理2 d防效为71.3%,．菌恳液处理8D后接种病原菌的防效仍在60%以上．箋验中还观察到,经拮抗菌Bn-130处理的辣椒苗茎杆和叶色正常,即使发病的植株病斑面积也无扩大趋势,生长发育正常．相比之下,对照植株叶片枯黄,茎杆病斑有继续扩展的趋势,整株萎蔫,生长发育受到严重影响．经Bn-130处理的植株发病程度较轻,其病情指数与对照相比,在p等于0. 05水平上达到显著,在p等于0. 01水平上达到极显著,可望作为辣椒疫病的生防菌株．2.2 生防芽孢杆菌Bn-130对辣椒的诱导抗病性

辣椒早疫病:辣椒疫病防治要及时促花王科技

灌施生防菌菌液后植物体内PPO、POD、PAL活性均有显著提高,其中PPO、POD活性增加量较大,6d左右达到最高峰(图la,图lb),随后酶活性有逐渐降低的趋向；PAL活性呈缓慢增长趋势,2～8 d仍未出现最大峰值(图lc)；在测试期中,生防菌菌液处理后辣椒植株的3种酶活性始终高于对照．3讨

论

随着现代科技的发展,化肥、农药的大量使用造成环境污染,致使农业生态系统中生物多样性下降,而植物拮抗细菌因与寄主植物在长期共同进化过程中形成密切的相互关系,且生存微环境稳定,成为化肥、农药和其它微生态制剂的最佳竞争者．它的合理应用将减少化学药剂造成的环境污染,提高农田生态系统的生物多样性,有利于保持生态平衡,对于实现辣椒病害安全、有效的治理具有十分重要的意义,

拮抗芽孢菌株Bn-130温室控病试验中,灌施菌悬液2d后灌根接种辣椒疫霉游动孢子,控病效果为74. 3%,处理8d后接种病原菌的防效仍在60%以上,表明其对辣椒疫病有较好的控制作用．同时辣椒苗经其处理后与对照相比,植株脱叶明显减少,植株倒伏也减少．拮抗菌Bn-130在平板上强烈抑制辣椒疫霉的生长,温室中对辣椒疫病也有较好的防治效果,因此可作为辣椒疫病的生防菌株作进一步研究．

Bn-130菌悬液处理辣椒苗后,植株体内PPO、POD和PAL活性均有所提高,其中PPO、POD活性增加较大,PAL呈缓慢增长趋势．3种酶在植物抗病过程中发挥着重要作用,PPO可催化木质素及其它酚氧化产物的形成,构成保护性屏障而抵抗病菌的入侵,也可以通过形成醌类直接发挥抗病作用；POD属于PR蛋白的PR-9家族,在木质素生物合成的最后一步催化H2 02分解而发挥作用；PAL是苯丙氨酸代谢的第一关键酶,与包括木质素、香豆素、类黄酮、羟基肉桂酸脂以及异类黄酮衍生物等在内的植物抗毒素的合成密切相关[16]．拮抗菌Bn-130能提高辣椒植株体内上述3种酶活性的变化,表明该菌能够在一定程度上诱导辣椒对疫病的抗性.

本实验由于试验过程中只采取单独1次灌施菌液,菌株Bn-130对辣椒疫病温室防治效果的评价还不够充分．增加施菌次数和改变施用方式是否更有利于防治辣椒疫病还需进一步研究,参考文献：[1]毛爱军,胡洽,耿三省．辣椒疫病接种鉴定技术研究[J].北京农业科学,1998, 16(2): 21-24.[2]樊钰虎,易龙,丁伟,等．辣椒中辣椒碱提取工艺条件的研究[J].西南大学学报（自然科学版）,2008, 30(1)：64 - 68.[3]张武军,张辉,王朝斌,等．0.3%苦·小檗碱·黄酮水剂防治辣椒病毒病的研究[J].西南师范大学学报（自然科学

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Disease-Control of a Blight-Resistant Bacillus Strain for

Pepper and Disease-Resistance Induction in the Plant

YI Longl,YAN 2han-yong2, XIAO Chong-gangl

7.School of Plant Protection, Southwest University, Chongqing 4007&,acute,15, China,

2. Sichuan Province Tobacco Company (Dazhou C,ty Branch), Dazhou Sichuan 63500, ChinaAbstract:A strain of spore-forming bacterium (Bacillus), Bn-130, was isolated from the thizospheric soilof pepper (Ca psicum annuum).The result from a greenhouse trial showed that Bn-130 isolate could effec-tively control the pepper phy论文范文hthora blight (Phy论文范文hthora capsici), the control efficiency being over60% after 8 day treatment with Bn-130. Polyphenol oxidase (PPO), peroxidase (POD) and phenylalanine ammomum-lyase (PAL) activities were induced by inoculation with Bn-130, increasing the activities of PPO, POD and PAL in varying degrees.Key words: Phy论文范文hthora blight of pepper, spore-forming bacterium (BacilLus), biocontrol, induced re-

sistance

责任编辑夏娟

总结：本论文可用于辣椒疫病论文范文写作参考研究。

辣椒早疫病引用文献: