简介:大学硕士与本科玉米组织培养毕业论文开题报告范文和相关优秀学术职称论文参考文献资料下载，关于免费教你怎么写玉米组织培养方面论文范文。
［摘 要］ 本文以玉米种子成熟胚为外植体进行组织培养,通过对外植体不同切割方式、不同碳源、不同培养基及不同激素的对比分析,建立一套最优的再生遗传转化体系,最终成功诱导出二倍体愈伤组织,并长成为二倍体植株.
［关键词］ 玉米；组织培养；再生体系；愈伤组织
［中图分类号］ S513 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1674-7909（2017）32-68-2
玉米是主要的粮食和饲用作物,在食品和化工行业占有重要地位.随着转基因技术的飞速发展,人们欲利用转基因技术获得高产量、高品质、抗虫害的玉米新品种.用玉米成熟胚为外植体诱导的愈伤组织,不受季节影响,获得植株快速,取材方便,而且外植体大小合适,是适合于玉米遗传转化的再生体系［1］.
本文以玉米种子成熟胚为外植体进行组织培养,通过对外植体不同切割方式、不同碳源、不同培养基及不同激素的对比分析,预建立一套玉米最优的再生遗传转化体系,为玉米转基因及基因功能的研究奠定良好基础［2］.
1.材料与方法
1 1 植物材料
选取玉米种子成熟胚为外植体.
1 2 试验方法
1.2.1 实验材料处理.一是浸泡处理,即在无菌水中浸泡3 d；二是种子处理,即种子切分成芽鞘和根鞘为外植体；三是温度处理,即先将种子置于低温4 ℃下存放36 h,而后转入高温34 ℃下诱导3 d.
1.2.2 外植体培养.将外植体置于诱导培养基上,无光、25 ℃培养20 d,随后取出进行继代培养,并记录.然后将愈伤组织转入分化培养基,25 ℃、光照2 700～3 000 l x下培养20 d 后进行统计；最后将再生植株移至壮苗培养基上,生根后移植即可.
1 2.3 种子切割方式.种子切割方式为横切和纵切.
1 2.4 碳源的选用.碳源选用麦芽糖和蔗糖.
1 2.5 激素的选用.试验中选用2,4-D和NAA 2 种激素.
1.2.6 愈伤组织的继代、分化培养.将初代愈伤组织移至继代培养基培养15 d,3 个周期后挑选最优愈伤组织置于分化培养基培养15 d.
2.结果与分析
2 1 切割方式对诱导愈伤组织的影响
种子横切和纵切,诱导率分别为69%和31%.可见,横切种子诱导不完全,不易形成愈伤组织,不易脱分化；而纵切种子诱导完全,易形成愈伤组织,容易脱分化.所以,种子纵切方式适合诱导愈伤组织.
2 2 碳源对诱导愈伤组织的结果
通过不同碳源对愈伤组织的诱导培养可见,N6M培养基出愈块数为32,胚性愈伤组织为17,胚愈率为53.1%；MS培养基出愈块数为35,胚性愈伤组织为19,胚愈率为54.2%；N6M培养基出愈块数为29,胚性愈伤组织为13,胚愈率为44.8%；M论文范文培养基出愈块数为42,胚性愈伤组织为24,胚愈率为57.1%.说明N6M培养基对诱导胚性愈伤组织现象明显,胚愈率最低,同时也说明麦芽糖作为碳源更适合诱导愈伤组织.
2 3 培养基对诱导愈伤组织的结果
通过LS、MS、N6 3 种培养基对比试验,结果显示：选用的85 个全胚中,N6M培养基中出现42 个胚性愈伤组织,出愈率为49.4%,愈伤组织生长迅速,胚性超强；M论文范文培养基中出现17 个胚性愈伤组织,出愈率为20.0%,愈伤组织胚性强；N6 培养基中出现33 个胚性愈伤组织,出愈率为38.8%,愈伤组织慢速生长,胚性弱.所以,N6M培养基最适合诱导.
2 4 激素对诱导愈伤组织的结果
2.4.1 2,4-D诱导全胚愈伤组织分化的结果.在全胚数为24 的情况下,2,4-D浓度在2.0 mg/L时,其胚性愈伤组织数最多7 块,愈胚率为29.15%；当2,4-D 浓度从2.0 mg/L增加到2.5 mg/L时,愈胚率为25%.说明不同浓度的2,4-D影响外植体愈伤组织继代培养,但各浓度间褐化率差别不大.本文选择浓度在2.0 mg/L 的2,4-D,较适合全胚愈伤组织的继代培养,且浓度在0.0 mg/L 时,愈伤组织的褐化率最高为75.0%,说明2,4-D浓度升高会抑制愈伤组织的褐化.
2.4.2 NAA诱导全胚愈伤组织分化的结果.本文将愈伤组织在NAA中诱导处理后,色泽变黄,呈现小粒状.在胚性愈伤块数为20的情况下,NAA浓度为0.4 mg/L时,全胚愈伤组织的分化率为15%；NAA浓度增加到0.5 mg/L时,其分化率为25%.说明分化率越大,愈伤组织分化培养的现象越好.所以；选用NAA的浓度为0.5 mg/L 时,最适合分化培养.
3.结论
本文以玉米种子成熟胚作外植体进行组织培养,通过对外植体选用纵切的切割方式,用麦芽糖作为碳源,在N6M培养基中诱导培养,选用0.5 mg/L 的NAA 激素和2.0 mg/L 的2,4-D激素整合分析,建立出一套玉米最优的再生遗传转化体系,最终成功地诱导出二倍体愈伤组织,并长成为二倍体植株.本研究为玉米转基因及基因功能的研究奠定了良好的基础.
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玉米种子组织培养引用文献:
[1] 植物组织培养和植物论文范本 植物组织培养和植物相关论文范本8000字
[2] 何首乌和组织培养自考毕业论文范文 关于何首乌和组织培养类硕士学位论文范文2万字
[3] 植物组织培养和植物论文范文集 植物组织培养和植物类有关论文范文检索2000字
