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山茶杜鹃论文范文

摘要：以杜鹃红山茶（Ｃａｍｅｌｌｉａａｚａｌｅａ）的幼嫩茎尖为试材进行组织培养研究,建立其快繁体系.结果表明,杜鹃红山茶芽诱导的最适培养基为ＳＨ＋１．０ｍｇ／ＬＺＴ＋２．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／ＬＩＡＡ,其芽萌发率为６４．４％；最适增殖培养基为１．０ｍｇ／ＬＺＴ＋１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ,增殖系数高达２．３６；最佳生根培养基为１／２ＳＨ＋２．０ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ＋１００ｍｇ／Ｌ活性炭,其生根率可达６１．７％.

杜鹃红山茶:植物“大熊猫”杜鹃红山茶开花

关键词：杜鹃红山茶（Ｃａｍｅｌｌｉａａｚａｌｅａ）；茎尖；组织培养

中图分类号：Ｓ６８５．１４；Q813.1+2 文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０13）21－5348-03

杜鹃红山茶（Ｃａｍｅｌｌｉａａｚａｌｅａ）为山茶科（Ｔｈｅａｃｅａｅ）山茶属（Ｃａｍｅｌｌｉａ）,因其外形极像杜鹃而得名,栽培上称为“四季杜鹃茶”或“杜鹃茶”.杜鹃红山茶是一个极其珍稀的山茶品种,有着“植物界大熊猫”之称.主要分布在云南、广西、广东、四川,野生数量稀少,茶花市场上也很少见,目前处在研究开发阶段,是珍贵的四季开花古茶花品种之一［１］.近年来,广东、浙江等地通过传统的嫁接和扦插方法获得杜鹃红山茶,但其繁殖速度慢,繁殖率低,满足不了市场需求［２］.目前,关于通过组织培养技术获得杜鹃红山茶的快速繁殖技术鲜见报道.本试验从繁殖快、成本低和性状稳定等角度出发,采用组织培养技术对杜鹃红山茶进行快速繁殖,为市场解决杜鹃红山茶茶苗供应问题提供技术参考.

１材料与方法

１．１材料

供试杜鹃红山茶幼嫩茎尖由重庆市南山植物园提供.采样时间为２０１０年４月中旬,试验地点为重庆市天沛农业科技有限公司组培车间.

１．２方法

１．２．１外植体的获得选取３～５ｃｍ长当年生幼嫩杜鹃红山茶茎尖为外植体,自来水冲洗干净后剪去叶片,留茎尖２～３ｃｍ.加少许洗衣粉溶解后浸泡剪好的材料５～１０ｍｉｎ,除去表面灰尘,然后用流水冲洗干净［３］,超净工作台紫外灯晾干［４］,放入０．１％升汞中灭菌５～６ｍｉｎ,再用无菌水冲洗４～５次,切掉茎尖基部,使茎尖控制在１ｃｍ左右接种于培养基中.

１．２．２芽的诱导将获得的无菌材料茎尖接种到不同组成的诱导培养基中进行芽的诱导.各诱导培养基的组成见表１.接种后放置在培养室内培养,前７ｄ暗培养,然后开双排灯进行光照培养,光照时间为１０～１２ｈ／ｄ,光照强度２０００～３０００ｌｘ,控制温度为（２５±２） ℃.每种处理接种３０瓶,每瓶接种１个外植体,３次重复.培养３０ｄ后观察并统计其生长情况,计算诱导率和成活率,以筛选出芽诱导的最适培养基.

诱导率＝（诱导出的芽数／接种的外植体数）×１００％

成活率＝（成活数／诱导出的芽数）×１００％［５］

１．２．３芽的增殖培养将诱导出来的芽从老组织上切割下来,如果是有几个芽的团块将其切成带有腋芽的茎段,接种到增殖培养基中,各增殖培养基的配比见表２.每处理接种３０瓶,每瓶接种１个芽,３次重复.３０ｄ后进行统计,计算其平均株高、增殖系数.

平均株高＝苗的总高度／苗的总数

增殖系数＝增殖后的总芽数／接种的外植体数

１．２．４生根培养从增殖的植株上切取健壮单芽,接种到生根培养基中进行生根培养,生根培养基的配比见表３.每处理接种１０瓶,每瓶接种６株,３次重复；４０ｄ后观察并统计其植株生长状况,计算生根率,平均根数.

平均生根数＝生根总数／接种外植体数

生根率＝（生根的外植体数／接种外植体数）×１００％

２结果与分析

２．１不同培养基对杜鹃红山茶芽诱导的影响

以ＭＳ、ＳＨ和改良ＭＳ为基本培养基,添加相同浓度及相同种类的植物生长调节剂,各配方组合见表１.从表１可见,３种不同培养基均能诱导杜鹃红山茶茎尖,其中ＳＨ培养基诱导效果最好,诱导率为６４．４％,成活率为１００％,且诱导出来的芽生长健壮,芽色绿,生长快.ＭＳ培养基的诱导率最低,为３８．９％,且诱导出来的顶芽容易枯死,影响成活率.因此,在杜鹃红山茶芽诱导过程中,最佳诱导培养基为ＳＨ＋１．０ｍｇ／ＬＺＴ＋２．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／ＬＩＡＡ.

２．２植物生长调节剂对杜鹃红山茶芽增殖的影响

以ＳＨ为基本培养基,添加不同浓度的植物生长调节剂ＺＴ、６－ＢＡ、ＩＡＡ对杜鹃红山茶进行增殖培养.从表２可以看出,在培养基中添加植物细胞分裂素ＺＴ的处理中,分化出来的杜鹃红山茶芽颜色浓绿,增殖系数高于不添加ＺＴ的处理,平均株高也明显高于不添加ＺＴ的处理.生长素ＩＡＡ的浓度对杜鹃红山茶增殖苗的平均株高和增殖系数的影响也很大,随ＩＡＡ浓度的升高,平均株高逐渐增高,但增殖系数却有所降低.因此,综合分析可知Ｃ８处理中添加１．０ｍｇ／ＬＺＴ＋１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ,杜鹃红山茶的增殖苗长势最好,平均株高为２．１８ｃｍ,增殖系数最高,为２．３６,芽色浓绿,健壮且生长快.

２．３植物生长调节剂对杜鹃红山茶组培苗生根的影响

在ＳＨ、１／２ＳＨ和Ｎ６培养基中添加不同浓度的植物生长调节剂ＩＢＡ、ＮＡＡ、ＩＡＡ和活性炭,对杜鹃红山茶的顶芽进行生根培养,培养４０ｄ后统计其生根情况,结果见表３.从表３可见,１２种处理均可诱导杜鹃红山茶顶芽生根.在添加相同植物生长调节剂的条件下比较基本培养基,ＳＨ培养基最不理想,生根数和生根率均较低,最高生根率仅为１７．６％,平均生根数最高仅为０．８３条,且植株生长缓慢,植株老化较其他处理快.１／２ＳＨ基本培养基处理最适合杜鹃红山茶顶芽生根的诱导,其生根率最高达６１．７％,此时平均生根数为１．５６条,且植株抽高快,叶形叶色都正常,根系较发达.

比较植物生长调节剂的种类及浓度对杜鹃红山茶顶芽生根的影响,ＩＢＡ较ＮＡＡ更适合,在添加ＮＡＡ的处理中植株基部容易产生愈伤,而只添加ＩＢＡ则不会；各处理中添加少量的ＩＡＡ有利于杜鹃红山茶顶芽生根的诱导,其生根率明显提高.因此,杜鹃红山茶顶芽生根的最适合培养基为１／２ＳＨ＋２．０ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ＋１００ｍｇ／Ｌ活性炭.

３小结与讨论

用杜鹃红山茶茎尖作为外植体进行快繁的过程中,诱导和增殖阶段都容易褐化.这与外植体中所含的酚类化合物和多酚氧化酶活性有直接关系［６］.在诱导和增殖的培养基中添加少量活性炭,或采取新生枝条半木质化的材料为外植体,能有效地减轻褐化现象［７］.

杜鹃红山茶在增殖过程中,植株生长情况与使用的植物生长调节剂种类有很大的关系,添加ＺＴ的处理中杜鹃红山茶明显比不添加ＺＴ的处理生长健壮.使用适当浓度的生长素ＩＡＡ有利于杜鹃红山茶的抽高.

杜鹃红山茶为山茶属植物,组织培养难度较大,尤其是生根阶段,国内外报道大部分仍需要采用滤纸桥液体培养诱导生根,并且对植物生长调节剂浓度和种类要求都很高,大部分采用高浓度的ＮＡＡ诱导山茶属植物的生根［８］.本试验采用基础培养基添加不同生长素进行诱导生根的方法,在生根培养的过程中发现添加ＮＡＡ的处理植株易老化,并且基部容易愈伤化.本试验结果表明,杜鹃红山茶的生根最适配方为１／２ＳＨ＋２．０ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ＋１００ｍｇ／Ｌ活性炭,生根率为６１．７％,平均生根数为１．５６条,且植株抽高快,叶形叶色都正常,根系较发达.此外,在本试验条件下,杜鹃红山茶诱导生根率仍然较低,有待进一步研究.

参考文献：

［１］侯鸣．杜鹃红山茶的栽培与繁殖［Ｊ］．湖南林业,２００９（８）：２９．

［２］黎运枢,崔统华,郑交经,等．杜鹃红山茶嫁接繁殖试验［Ｊ］．广东林业科技,２００４,２０（３）：３７－３８．

［３］朱广廉．植物组织培养中的外植体灭菌［Ｊ］．植物生理学通讯,１９９６, ３２（６）：４４４－４４６．

［４］陈泽雄,刘奕清,黄登艳．‘渝茶１号’离体培养及植株再生研究［Ｊ］．西南大学学报（自然科学版）,２００９,３１（１２）：６７－７０．

［５］许丽琼,涂炳坤．香椿叶片组织培养和快繁技术的研究［Ｊ］．湖北农业科学,２００７,４６（１）：２４－２６．

［６］曾镭,刘燕．植株组织培养中褐化问题的研究进展［Ｊ］．安徽农学通报,２００７,１３（１４）：４９－５０．

［７］杨素娟,王玉书,王立．茶树未成熟胚培养根的诱导及形态发生［Ｊ］．中国茶叶,１９８９（２）：１４－１５．

［８］谭文澄,戴策刚．观赏植物组织培养技术［Ｍ］．北京：中国林业出版社,１９９８．２１８－２２０．

总结：本论文可用于山茶杜鹃论文范文参考下载，山茶杜鹃相关论文写作参考研究。

杜鹃红山茶引用文献: