《台湾牡丹樱花快繁体系建立与驯化技术》
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摘 要：以台湾牡丹樱花当年新生枝条为原材料,采集生長健壮的枝条腋芽（侧芽）建立诱导、增殖、生根、出棚驯化的台湾牡丹樱花快繁体系.结果表明：采集3月中旬至4月初的当年生枝条最为适宜;外植体消毒时间11 min,污染率最低,诱导率最高;最适的诱导培养基：MS+1.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA+30 g糖;继代培养：MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+30 g糖,增殖系数2.04;生根培养：1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+15 g糖+1 g AC,生根率为83.21%;移栽采用基质：泥炭土∶珍珠岩∶草木灰等于5∶3∶2,移栽成活率最高,达到87%.
关键词：台湾牡丹樱花;快繁体系;建立;驯化技术
文章编号： 1005-2690（2020）10-0003-02 中图分类号： S685.99 文献标志码： B
牡丹樱花原产我国台湾省,又名台湾牡丹樱,花深红色、重瓣,花量大,盛花时红花满树、花团锦簇,是最具发展潜力的樱花新品种之一.牡丹樱花属蔷薇科落叶乔木,伞状树型,花先叶开放,花下垂,萼筒钟状;花瓣深红色,不完全开展,呈半开状;花朵授粉后,雌蕊留存,萼筒与花瓣自然脱落,花梗、萼筒均无毛,花期2月初至3月初;幼枝绿色,被短柔毛,不久脱落,老枝紫红色.
台湾牡丹樱花颜色鲜艳亮丽,是早春重要的观花树种,可用于观赏园林;也可种植于山坡、路边、建筑物前;还可以群植,造成“花海”景观,具有很好的园林观赏价值[1-4].
1 材料与方法
1.1 材料选取
3月下旬至4月中旬,从沙淤园区采集生长健壮、无病虫害、花型优美的当年生半木质化台湾牡丹樱花枝条为试验外植体.
1.2 试验方法
以MS、1/2MS为基本培养基,调节培养基pH值为5.6,琼脂粉6.5 g/L,蔗糖1.5%～3%,配以植物激素BA、IBA、NAA,以及AC和基质土.
1.2.1 外植体获取
采摘前1 d用多菌灵消毒液喷洒枝条,于次日晴天中午采集消毒过的健壮新生枝条,于实验室待处理.用饱和洗衣粉液配以软毛刷洗刷干净枝条,用流水冲洗1 h.后剪切为1～2 cm带芽小段,放置于超净工作台中备用.
在超净工作台中用75%酒精浸泡1 min,无菌水冲洗3次,每次4 min.用0.1%升汞浸泡,以不同的消毒时间（8 min、11 min、15 min）处理外植体,用无菌水冲洗4次,每次4 min.
1.2.2 诱导培养
以MS为基本培养基,添加不同浓度的BA（0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0 mg/L）、IBA（0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.15 mg/L）,共计12组,每组重复3次,每次40瓶,每瓶1个外植体.
1.2.3 继代培养
以诱导培养的芽体为原材料.以MS为基本培养基,添加不同浓度的BA（0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L）、NAA（0.05 mg/L、0.1 mg/L）,共计6组,每组重复1次,每次40瓶,每瓶5个新芽.
1.2.4 生根培养
以继代培养的继代苗为原材料（2～3片叶、2～3 cm高）.以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的IBA（0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L）、NAA（0.5 mg/L、1.0 mg/L）、AC 1 g,共6组,每组重复1次,每次40瓶,每瓶5个继代苗.
1.2.5 室外移栽
选取生长健壮的生根苗,移出培养室,在室外驯化21 d,开瓶炼苗3 d,在不同配比的基质上移栽（泥炭土∶珍珠岩∶蛭石等于5∶3∶2、泥炭土∶珍珠岩∶草木灰等于5∶3∶2、泥炭土∶蛭石∶草木灰等于5∶3∶2）,共计3个处理,每个处理2 000株,分别于7 d、30 d统计存活率.
2 结果与分析
2.1 外植体获取
外植体升汞消毒分3组对照,分别计算污染率、存活率、死亡率.消毒8 min,污染率43.15%、存活率48.35%、死亡率8.50%;消毒11 min,污染率30.17%、存活率55.33%、死亡率14.50%;消毒15 min,污染率14.70%、存活率45.11%、死亡率40.19%.综上结果,升汞消毒8 min,污染率高,达不到要求的灭菌效果;升汞消毒15 min时,能有效避免外植体的污染,但外植体的活性明显降低,死亡率较高,达40.19%;升汞消毒11 min,其污染率、死亡率适中,存活率达到55.33%,是最适合的升汞灭菌时间.
2.2 激素诱导培养
牡丹樱花的诱导培养共设计了12组对照,统计其诱导率,结果见表1.由表1可知,第8组培养基的诱导率最高,达到59.16%;第2、4组培养基的诱导率最低,为22.50%;其余各组差距不大.表明第8组培养基MS+1.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA 为最适培养基.
2.3 增殖培养
本次增殖培养是以MS为基本培养基,共计6组,统计结果见表2.经过初选,6组配比中,第1组的增殖系数最低,为1.31;第5组的增殖系数最高,为2.04.表明第5组配比MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+30 g糖更适合台湾杜鹃樱花的继代培养.
2.4 生根培养
本次生根培养以1/2MS为基本培养基,不同激素配比,共6组,统计分析见表3.由表3可见,第4、5组的生根率为83.21%、72.10%,明显高于其他各组配比,且随着IBA浓度的增加,生根数反而减少.因此4组1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+15 g糖+1 g AC为台湾牡丹樱花的适合培养基.
2.5 驯化移栽
以生根的小苗经过驯化21 d,开瓶炼苗3 d后移栽,在3种不同配比的基质上移栽,分别于7 d、30 d统计存活率,结果见表4.通过统计存活率,前7 d,第2组、3组的成活率相差不大,30 d时第2组明显高于3组,表明采用基质泥炭土∶珍珠岩∶草木灰等于5∶3∶2适宜台湾牡丹樱花的移栽.
3 结论
以台湾牡丹樱花当年新生枝条为材料,采集3月中旬至4月初生长健壮的枝条腋芽（侧芽）建立诱导、增殖、生根、出棚驯化的牡丹樱花快繁体系具有明显的市场意义.
试验结果表明：采集3月中旬至4月初的当年生枝条,其生长旺盛,木质化程度低,作为外植体最为适宜;外植体的最佳消毒时间为11 min,既能有效降低污染,又不影响腋芽（侧芽）的活性;在诱导过程中BA的增加,使诱导率有所提升,但超过1.5 mg/L时,诱导能力又有所下降.
在组织培养过程中,小苗的生长有多种影响因素.本试验着重于BA、IBA、NAA这3种激素对台湾牡丹樱花组培影响的研究,而对于其他激素及培养条件的影响未作关注.今后可以对加入更多的培养条件及激素深入探讨,以求获得更加适宜台湾牡丹樱花的组培条件.
参考文献：
[ 1 ] 郑慈真,何文杰,尹茜,等.樱花组培快繁体系的建立及组培苗移栽技术研究[J].乡村科技,2016（3）：6-10.
[ 2 ] 王红梅,李园莉.垂枝樱花组培技术研究[J].黑龙江農业科学,2016（9）：1-5.
[ 3 ] 李勇,方扬辉,郑雪燕,等.福建山樱花组培快繁技术[J].森林资源培育,2015（1）：20-23.
[ 4 ] 王慧娟,孟月娥,赵秀山,等.樱花组培苗的移栽技术研究[J].河南农业科学,2006（11）：99-101.
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樱花和牡丹引用文献:
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