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周口市农产品质量安全检测中心 刘金权
目前,常用的农药按化学结构大致可分为以下几类：有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类等.针对这些农药,农药残留速测技术可分为仪器分析法、免疫分析法、生物传感器法、活体检测法、酶抑制法、实验室自动化等,其中酶抑制法是目前应用最广、最成熟的农药残留速测技术.
一、 酶抑制法
在我国农药中,70%为有机磷农药,而在我国生产使用的有机磷农药中,70%为剧毒、高毒类农药,而且大多数是禁止在蔬菜作物上使用的.酶抑制法属于生物化学测定法类型,是相对成熟的一种对有机磷与氨基甲酸酯类农药进行残留检测的技术,目前在我国农药残留速测中使用最为广泛.有机磷与氨基甲酸酯类农药可特异性地抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶（AchE）的活性,破坏神经的正常传导,使昆虫中毒致死,利用这一毒理学原理,将乙酰胆碱酯酶与样品反应,根据乙酰胆碱酯酶活性受到抑制的情况,可判断出样品中是否含有有机磷与氨基甲酸酯类农药.利用酶抑制检测蔬菜水果等农产品目前有农药残留快速测定仪（速测仪）和农药残留快速测定卡（速测卡）两种检测方式.
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二、农药残留快速测定仪
(一)农药残留快速测定仪的检测原理
有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关关系.正常情况下,酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解,其水解产物与显色剂反应,产生论文范文物质,用农药残留速测仪测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药.
(二)农药残留快速测定仪在检测过程中应注意的事项
1、试剂保存与配制：在保存与配制试剂时要严格按照试剂使用说明书操作.需要冷藏保存的酶试剂和底物要在0~4℃环境下冷藏保存,否则可能会导致试剂提前失效而造成检测结果的不准确,需要常温保存的缓冲液和显色剂可在室温下保存；配制试剂时应注意各种试剂对应的稀释用液及用量,一旦加错会造成试剂失效.
2、样品处理.对葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄液中,含有对酶有影响的植物次生物,容易产生假阳性.处理这类样品时,可采取整株浸提或采用表面测定法.对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株浸提法,以减少色素的干扰.另外,由于同一株待测样品,不同部位的农药含量也不一样,因此,进行重复性检测时,最好为同一个待测液的不同次数测定,否则可能会出现因取样不同出现重现性不好的情况.
3、提取.对样品的提取振摇时,最好使用振荡器,以达到均匀和彻底的效果.如果手动振摇,尽量注意幅度不要太大,以免溅出,影响结果.
(三)农药残留快速测定仪结果判断
样品的抑制率在40%~50%为可疑农药残留超标样,大于50%为超标样.抑制率≥40%的样品需要重复检测两次以上,超过50%的超标样应用气象色谱仪进行精确检测确认.
三、农药残留快速测定卡
(一)农药残留快速测定卡的检测原理
胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色）,有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否含有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药.
(二)农药残留快速测定卡在检测过程中应注意的事项
1.测定条件
每批测定应设1个洗脱液或纯净水的空白对照卡,样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性.药片表面要加足够的缓冲液或样品溶液以确保放置10min进行预反应后的药片表面仍保持湿润,如果10min预反应过程中,白色药片上水分蒸干,应添加相同的提取液,否则会出现假阳性的结果.
2.测定环境
速测卡对农药非常敏感,测定时如果附近喷洒农药或施用卫生杀虫剂,以及操作者或器具蘸有微量农药,都会造成对照和测定药片不变蓝,为避免造成检测结果误判,在操作时应注意周边环境.
3.样品处理
一些蔬果如：生姜、葱、蒜、木瓜、菠萝、辣椒、番茄、萝卜、茶叶等汁液中含有破坏酶活性或使蓝色褪色的物质,为避免假阳性结果,检测这些蔬果时应采用表面测定法；对一些含叶绿素较高的蔬菜如：韭菜、芹菜、香菜、茭白等应采取整株蔬菜浸泡法,以减少色素的干扰；样品处理时不易剪得太碎,浸泡时间不易过长,每剪一个样品,剪刀或水果刀要洗净后方可处理另一个样品,每个样品需要更换一次玻璃棒和滴管或用纯净水洗3次后再使用,以免互相污染,影响检查结果.
(三)农药残留快速测定卡的结果判断
与空白对照卡相比较,白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果,不变蓝为强阳性结果,说明农药残留量较高.显浅蓝色为弱阳性结果,说明农药残留量相对较低.白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果.
四、酶抑制法速测技术的优缺点
酶抑制法速测技术操作简便、易行、成本低、前期投入少,解决了部分我国农产品质量安全监管难的问题,但也有一些不足之处.
（一）酶抑制法属于定性（半定量）的检测方法,不能给出准确的定性定量结果,不能按标准判定合格与否,只能作为田间生产检测盒市场初级检测.
(二)目前选用的酶只能用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留量检测,不适用于蔬菜中其他类型农药残留的检测.
（三）对某些种类的蔬菜中农药残留的检测结果可能出现假阳性或假阴性.鉴于酶抑制法的缺点,开发出灵敏度高、适应性广泛、能定量检测且方便快捷的检测方法是农药残留快速检测技术的发展趋势.
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农药残留检测引用文献:
[1] 黄瓜中有机磷农药残留检测方法论文
[2] 活体检测法在农药残留检测论文
[3] 农药残留快速检测的论文
