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河南省商丘市*民医院检验科,河南商丘 476100
[摘 要] 目的 探讨化学发光免疫分析技术（ECLIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）在乙肝病毒血清学检验中的应用效果.方法 选取2012年1月—2014年1月在我院就诊的疑似乙肝患者150例,分离血清后分别应用ELISA和ECLIA进行检测,比较两种检测方法的效果.结果 ELISA和ECLIA检测出HBsAg阳性分别63例和82例,两者比较差异显著（P<,0.05）,同时ECLIA法检测的批内CV和批间CV的重复性均明显高于ELISA法（P<,0.05）.结论 与ELISA检验法比较,ECLIA法具有更高的HBsAg阳性检出率,且能进行精确的定性定量检测,值得临床推广应用.
[关键词] 乙肝病毒；血清学检验；ELISA；ECLIA
[中图分类号] R373.21 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）11（b）-0032-02
[作者简介] 张怡莎(1982-),女,汉族,河南省太康县,本科,技师,研究方向：免疫类,从事的工作：医学检验.
我国是乙型肝炎病毒（HBV）感染率较高的国家,且目前尚无针对该病的特效疗法,因此对于该病进行早期诊断尤为重要.目前采用标记免疫学方法检查HBV血清学指标是诊断HBV感染的主要手段,目前常用的免疫学方法主要包括化学发光免疫分析技术（ECLIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）两种,本文就这两种方法在乙肝病毒血清学检验中的应用进行比较,以为临床选择有效的诊断手段提供依据.
1.资料与方法
1.1 一般资料
选取2012年1月—2014年1月来我院就诊的疑似乙肝患者150例,所有患者诊断标准均参照《WS299-2008乙型病毒性肝炎诊断标准》,其中男性86例,女性64例,年龄18~56岁,平均年龄（41.3±5.7）岁.
1.2 检验方法
1.2.1 仪器和试剂对所有患者均分别行化学发光免疫分析技术（ECLIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检验 .
1.2.2方法所有患者均于检验当天清晨空腹抽取肘部静脉血10 mL,以3000r离心率离心10 min后分离出血清待检.将所有患者的血清均分为两份,先后采用ELISA和ECLIA进行检验,每次以定值参比血清作为质控,操作均严格按照试剂盒说明书进行.
1.2.3 ELISA检验方法和判定标准采用双抗原夹心法进行测定,用去离子水稀释将50 mL的浓缩洗涤液至1000 mL置于专门的洗液瓶中,并将酶标试剂置于试剂预定位置读取吸光度值,以阴性对照平均吸光度（A）值×2.1为临界值,以标本OD值与临界OD值的比值（S/OD）≥1.00判定为阳性,否则判定为阴性.
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1.2.4 ECLIA检验方法和判定标准同样也采用双抗体夹心法进行检验,将配套反应杯、吸头和洗液等放置在预定位置,采用75%酒精棉球擦洗试剂,将HBsAg和生物素标记的HBsAb与待测样品共同培育,再和亲和素标记的磁微粒孵育,经过反复洗涤使游离的抗原和抗体与复合物分离,并加入三丙胺,启动ECL反应,用其激光强度判定HBsAb浓度,若HBsAb＞10 mlU/mL则判定为阳性,否则判定为阴性.
1.2.5重复性比较选取HBsAg含量低、中、高浓度的阳性血清共分成20份进行冷冻保存,每天测量1次,其中10份计算批间重复性,其余10份用来计算批内重复性.
1.3 统计学方法
应用SPSS 15.0处理所有数据,计数资料应用χ2检验,以P<,0.05表示差异有统计学意义.
2.结果
2.1 HBsAg阳性率比较
对ELISA和ECLIA两种检测方法的阳性率比较,ECLIA测定的HBsAg阳性率明显大于ELISA,且差异显著（P<,0.05）,详见表1.
2.2 重复性比较
对ELISA和ECLIA两种检测方法的重复性比较,除高浓度HBsAg含量比较外,其余指标结果的比较均显示ECLIA的重复性明显优于ELISA,且差异显著（P<,0.05）,详见表2.
3.讨论
乙型肝炎病毒是一种全球性传染性疾病,我国乙肝病毒表面抗原（HBsAg）携带者高达10%[1],其中HBsAb（乙肝病毒表面抗体）是人体感染HBV后针对HBsAg产生的特异性抗体,由于目前尚无特效疗法,所有早期诊断HBsAb尤为重要[2].在本研究中我们对乙肝病毒血清学检验分别应用ELISA和ECLIA进行检验比较,结果显示ECLIA法HBsAg阳性检出率为54.7%,明显高于ELISA法的42.0%（P<,0.05）,这主要与两种不同检验的具体方法有关,其中ELISA法是临床中传统的诊断乙肝方法,因其具有简便、快速、论文范文低廉的特点,因此被广泛应用于HBsAg的检测中,但该方法仅能进行定性分析,不能进行定量分析,同时当待测标准中物质浓度过高时可能会出现假阴性,且由于不同厂家生产的抗原和抗体试剂具有较大的差异,加之反复洗板带来的误差,更易出现较高的假阴性[3-4].ECLIA技术是一种采用生物素-亲和素技术,其在电极表面可由电化学引发的特异性化学发光反应,是目前最为先进的化学发光免疫测定系统之一[5].
ECLIA技术使用的载体是受电磁铁控制的顺磁性微粒,其全面的实现了检测的自动化和标准化,减少了因人工操作带来的误差,并可精确的进行定性定量分析,大幅度减少了批内、批间的误差[6-7].同时电磁铁的电磁快速消失性有利于游离抗体和复合抗体的分离,从而降低了由游离抗体所导致的假阴性结果,提高了ECLIA检测的特异性[8-9]从本研究批内、批间重复性的研究结果中发现,两种方法检出率的差异主要集中在低浓度,而高浓度无显著差异（P<,0.05）,这说明ELISA可对高浓度的HBsAb进行检测,而对低浓度的HBsAb检测率较低,而ECLIA具有更加广泛的检测方法,同时在我们的检验结果中,其检出率差异主要集中在低浓度区,而高浓度区的差异无统计学意义（P>,0.05）,这可在一定程度上说明ELISA更适用于高浓度HBsAb,而ECLIA的检测范围更广,而加大对低浓度HBsAg的检出率可更加有效的控制传染源[10-11].
总之,与ELISA法比较,ECLIA法在乙肝病毒血清学检验中具有更高的论文范文性,可明显提高HBsAg的阳性检出率,并能准确的进行定性和定量分析,并可早期发现病情,从而更好的为临床及时可控制传染源提供依据,为改善患者病情赢得时间,意义重大,因而值得临床推广应用.
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（收稿日期：2014-10-08）
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