农业学论文范文参考 农业学毕业论文范文[精选]有关写作资料

目录

1. 第一篇农业学论文范文参考：*与新中国粮食工作的大政方针研究
2. 第二篇农业学论文样文：新中国初期三十年农业发展研究
3. 第三篇农业学论文范文模板：集体化时代的山区建设与环境演变
4. 第四篇农业学论文范例：新中国农民教育发展研究
5. 第五篇农业学论文范文格式：猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白4调控IFN-β转录机制的研究

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第一篇农业学论文范文参考：*与新中国粮食工作的大政方针研究

*在探索中国社会主义革命和建设道路过程中,始终重视解决粮食问题,领导制定了许多与粮食工作有关的大政方针,本文选取了统购统销、“以粮为纲”、农村人民公社的粮食分配制度、“备战、备荒、为人民”方针和农业学大寨运动等五个与粮食工作紧密相关的问题,分析它们提出的背景、*与它们的关系,以及它们对粮食工作产生的实际影响,进而从总体上对*为解决中国粮食问题所付出的努力作一历史评价,以期为今天的人们从根本上解决粮食问题提供历史的借鉴.

一、统购统销政策被认为是新中国成立以后最值得人们关注、也是影响最深远的经济政策之一,它主要是由陈云提出来的,但得到*的高度赞同和支持.*之所以赞同和支持这项政策,是因为统购统销政策与*改造个体农民的思路相吻合,符合*社会主义工业化的路径选择,符合*改造私营工商业的要求,体现了新中国建立初期*对*和地方关系的思考.

二、“以粮为纲”方针是*提出来的,它既反映了以*为代表的中国*人对粮食问题的担扰和重视,也说明了党和政府为解决粮食问题所采取的政策倾向.*提出“以粮为纲”方针,首先是他历来重视粮食问题的真实反映和自然延续.此外,它还包含两方面的深层次因素：其一,以粮食生产为中心的农业工作要为国家工业化作出更多的贡献.因为中国工业化的资金主要依靠内部积累,而内部积累的重要来源是农业,农业的中心是粮食生产,抓住了粮食这个纲,工业化所需的资金、市场、原料等问题都可以得到解决.其二,*1958年提出“以粮为纲”,包含着以农业大跃进促进工业、特别是钢铁工业大跃进的现实考虑.在“文化大革命”中,“以粮为纲”发挥了两个方面的独特作用：第一、“以粮为纲”是*提出并充分肯定的基本方针,这成为上至国务院,下至各省、市、县的一些干部坚持抓农业生产,特别是粮食工作的最好理由.第二、“以粮为纲”的方针对“*”时期的农业科技工作和农业科技工作者起到了一定的保护作用.但在“文化大革命”期间,“以粮为纲,全面发展”的方针在农业生产中并没有得到真正的执行,在很多地方变成了“以粮为纲,其余扫光”,根本谈不上“全面发展”.特别是对生态和环境的破坏,反过来又对粮食生产的健康发展造成不良影响,形成一种恶性循环.最终,在国家进入改革开放新时期以后,**放弃了“以粮为纲”方针.

三、*与农村人民公社的粮食分配制度之间的关系.文章阐述了公共食堂的兴起,分析了公共食堂的平均主义制度特征,并指出*不是农村公共食堂的发明者,但他是公共食堂的赞美者、支持者和鼓励者.在公共食堂逐步暴露其缺点和弊端后,*仍是公共食堂的维护者.但*最终还是从实际出发,接受了停办农村公共食堂的主张.文章认为,农村人民公社建立以后,它的所有制形式经历了从人民公社大集体所有制,到以生产大队为基本核算单位,最后到以生产小队(后来改称为“生产队”)为基本核算单位的演变过程.其最终确立的“*所有、队为基础”体制与*有着密不可分的关系.最后,文章从五个方面分析了影响*思考与决策农村粮食分配制度的基本因素：其一、青年时代对“新村”理想的向往；其二、对战争年代军事共产主义和供给制生活的迷恋；其三、对“资产阶级法权”的误解；其四、*的实践特性,使他善于从实践中发现问题,纠正错误；其五、对人民群众生活及其利益的关怀.

四、*在指导国民经济第三个五年计划的制订中,提出了“备战、备荒、为人民”的方针.这个方针的提出有众多因素,特别是与*对中国粮食问题的认识紧密联系在一起.它深刻反映了*对“大跃进”运动后中国在粮食问题上所存在的严重困难的越来越清醒的认识和对解决粮食问题的战略思考,从而对六、七十年代的中国粮食工作及其它工作产生了重要影响.

五、*与农业学大寨运动之间的关系.文章在简要介绍了*号召农业学大寨的经过后,重点分析了*为什么要号召“农业学大寨”的原因和“农业学大寨”运动对中国粮食生产的影响.文章认为,“大跃进”和人民公社化运动遭遇严重挫折,包括农业在内的国民经济和社会发展陷入了严重困难境地,党内外和国内外种种责难、非难和质疑之声泛起,其中就包括对农业集体化和公社化的非议,*在党内外感受到了沉重的政治压力.为此,*努力寻找各种补救措施,以排除这种政治压力.在这个背景下,大寨典型被作为一种回击非集体化的有力武器进入了*的视野.也就是说,在影响*提出“农业学大寨”号召的各种因素当中,回击对农业集体化的非议和质疑是对*号召“农业学大寨”的决策行为产生了重要影响的主要因素.而“农业学大寨”运动对中国粮食生产的影响,主要从两方面分析：其一、农业学大寨运动的开展促进了各级领导干部和人民群众对农业的重视和投入,从多方面改变和改善了农业生产的基础条件.这是农业学大寨运动期间中国的粮食生产稳中有增的一个重要原因.其二、农业学大寨运动中所提倡的“左”倾思想观念、所推行的“左”倾政策,严重地束缚、压抑乃至摧残了劳动者的生产积极性.这是农业学大寨运动没有从根本上解决中国粮食问题的重要因素.

六、文章最后从整体上用三句话对*为解决新中国粮食问题所付出的努力作出一个历史评价：*一直高度重视粮食问题；*一直在努力解决粮食问题；*一直没有解决好粮食问题.

第二篇农业学论文样文：新中国初期三十年农业发展研究

以往对新中国初期三十年农业发展的相关研究,大多集中在某一时段农业发展中的特定问题上,并多以截面分析为主.但农业发展是连续系统的过程,这样的研究无法展示整个发展过程,也不利于挖掘主要发展线索和客观规律.故本文尝试将新中国初期三十年农业发展进行打通研究,在宏观分析体系中整理、归纳和审视农业发展状况,从中提炼出主要发展线索和规律,并做出学术史总结.这样还可实现三方面的实践意义:一是有利于改变目前“重改革后三十年,而轻前三十年”历史经验总结现状,为正确理解改革前后两个三十年关系提供相应历史经验和支撑,二是可通过对相关重大历史事件考察,为目前中国政府所采取的各项涉农政策提供相应历史依据.三是可为中国目前刚启动的工业反哺农业政策提供相应的历史依据和理论支撑.

在具体研究过程中,本文首先将新中国初期三十年历史阶段进行了划分,确立了基本分析框架.然后,围绕各个历史阶段农业发展主题,提炼出了中国*因此而做出的各种政策选择和安排,并分析了由此而产生的实际效果和历史影响.在整个分析过程中,本文注重三方面内容的考察:一是注重对各历史阶段具体政策制度选择原因、实施过程、存在问题、绩效与历史影响等内容的阐述和分析.二是注重对各种已选政策间关联性问题,包括逻辑问题、因果问题等的具体分析和阐述,目的在于能挖掘出各种政策安排的共同动因和作用机制.三是注重对不同历史阶段农业发展基本规律、特点和整体状况的系统分析.

本文所做的学术史总结如下:

新中国初期,土地改革以解放农村生产力,恢复和发展农业生产为根本出发点和落脚点,平稳有序地开展并最终顺利完成.究其原因,主要得益于*对“和平土改”主张的摒弃和减少变革成本政策的采用,从而为农业经济恢复发展创造了首要条件,与新中国初期农村社会主义道路和国家工业化发展道路密切相关的互助合作,在中国*逐步集体化思想道路确立下,被有效引导并不断推进,农业经济恢复发展得以加快,修养生息和城乡物资交流等措施也为农业经济恢复发展提供了有效保障.

过渡时期,以“工业化”为主体的基本纲领和路线的确立,使中国“三农”承担起高积累的重任重负.于是,在工业化战略迫切需求下,国家通过对富农、中农、贫农三者间博弈,采取阶级斗争政治运动方式,使农业生产合作化快速推进.与农业合作化相配套,统购统销政策在严峻粮食供求矛盾下无奈实施,却在短期效果和长期历史影响上产生不同后果.工农城乡关系也由“比较协调”向“开始恶化”转变.尽管国家通过宏观行政手段不断加强城乡联系,使城乡关系继续保持了向前发展势头,但它依旧确定了以后城乡关系的走向和大体情况,对目前城乡二元格局产生重要影响.

在服务于“逐步集体化”思想的各种制度安排的路径依赖作用下,经济建设的大跃进和农村制度建设的公社化随大规模农田水利建设运动兴起.正如粮食统购统销需由合作化配套一样,大跃进也需由人民公社配套.事实上,人民公社的兴起正与*领导人“农业生产合作社规模太小不适应水利化和机械化发展要求”的共识有关.不仅如此,它还有利于地方工业和社区福利事业从无到有的建设.尽管从理论上讲人民公社似乎会更有利于降低政府与农民的交易费用,增加规模效益.但实际上它本身无法避免和解决农民内部相互剥夺问题,即对富社富队财富的剥夺,对勤劳农民收入的剥夺和因干部贪污腐败而造成的对普通农民群众劳动成果的剥夺.这种农村内部剥夺极大破坏农村生产力,对工业化极为不利,最终致使农村经济遭受严重挫折.鉴于此,*开始初步纠正“大跃进”和“人民公社”中的错误,但在工业化原始资本积累相关制度的路径依赖下,纠错过程显得极其曲折和反复,最终导致大饥荒的严重后果.

农业经济政策调整时期,国家采取各种措施强化农业基础地位认识.当时,*敏锐认识到恢复和发展农村经济核心问题实质上是解决人民公社体制问题,于是明确将人民公社基本核算单位由原来生产大队下放到生产队,有效解决了人民公社农民内部剥夺问题.农业学大寨在苏联外援断裂的重要历史背景下,也应国家工业化战略所需而兴起.它为促进当时农业恢复和发展,发挥了积极作用,突出表现在农田水利建设上.值得注意的是,在调整过程中,党内就两大基本矛盾和包产到户问题产生严重分歧,由此引发农村意识形态的教育与整顿——阶级斗争下的社会主义教育运动及贫下中农协会的成立.事实上,这两种做法从根本上讲对防止农民内部剥削比较有利,但“阶级斗争”下的社教运动在一定程度上其实也干扰了农村经济政策的贯彻执行,进而为文化大革命埋下伏笔.

*中的农业问题并非没有争议性,同样在高层领导人内部有所谓路线分歧,甚至在农村还有许多与农业学大寨并非一致的务实做法,农村中所谓自发资本主义以逆流方式一直零星出现和顽强表现.这些争议性内容的存在,在一定程度上减轻了“左”倾错误对农业的危害,使农业在不断调整中缓慢增长,农田水利基本建设取得不小成绩,农村工业也得到一定程度发展.这一时期,以降低城市消耗成本,服务工业化发展战略为根本目的的城镇人口反向流动措施,因国家缓解城市就业压力过大而被临时采取.农村小学教育由公社下放到生产队办,经费、校舍、师资等问题根本无法解决,农村教育质量难以保证.*时期,存在一定缺陷弊端的“合作医疗”和“赤脚医生”普遍建立,并急遽改变了当时农民群众看病难的状况,在二元社会框架下最大限度实现了卫生公平.农村文化生活则完全是政治性的单调活动.

通过对新中国初期三十年不同历史时期农业发展状况的具体分析,我们发现:新中国初期三十年农业有着内部和外部两个主要发展线索.一是以推动传统农业向现代农业逐步转变为核心内容的内部发展线索,二是以满足国家工业化战略原始资本需求为核心内容的外部发展线索.围绕这两个主要发展线索,可对新中国初期三十年的“三农”发展历程进行基本评述.总体上看,新中国初期三十年“三农”作为工业化原始资本积累过程中的剥夺对象,并不是自身没有发展或“停滞”,而是工业化原始积累的某种必然.因此,对新中国初期三十年农业发展的历史成就与历史地位,应给予充分的估计,并要深刻认识到历史遗留下的“三农”问题是一个全局性问题,解决之法必定要在三农之外,而整个过程也必定是一个长期的过程,充满曲折和坎坷.这些认识也是判断目前政府所采取的各项“三农”政策是否科学有效的一个基本理论认识.

第三篇农业学论文范文模板：集体化时代的山区建设与环境演变

自抗日战争时期中国*在根据地推行互助组至20世纪80年代初人民公社体制终结的特殊历史时期——集体化时代,是中国山区变动最为剧烈和深刻的时期.在此期间,建设什么样的社会主义新山区,如何建设社会主义新山区一直是夺得政权的中国*孜孜追求的目标.以国家话语为中心的一系列山区建设工程,前后相继,一路走来,促使中国山区面貌发生了翻天覆地的变化.因此,加强对集体化时代山区建设的研究,不仅可以为当前学界方兴未l艾的集体化时代中国农村社会研究添砖加瓦,而且能够为当前山区的社会主义新农村建设提供理论支撑.

本文以邢台县西部山区为中心,以山区建设为研究对象,利用新近发现的《乔钦起工作笔记》,结合基层档案材料和田野调查所得的口述资料,着重考察集体化时代邢台县西部山区广大干部群众认识山区、建设山区的总体历程,探讨集体化时代的山区建设活动与政治、经济、文化、环境之间的互动关系及这种关系是如何影响山区的命运的,进而对集体化时代山区建设的历史地位和当前山区的社会主义新农村建设进行反思.

邢台县西部山区人多地少,长期存在一个粮食问题.由于耕地不足和农业生产技术落后,传统社会时期的邢台县西部山区农民过着“糠菜半年粮”的贫苦生活.集体化时代的邢台县西部山区建设,一方面向山要地、大修梯田,向河要粮、大造滩地,使耕地面积大量增加.另一方面采取大力兴修农田水利、修整土地、增施肥料、合理密植、推广新的耕作技术和优良品种、推广农业机械等措施,提高了粮食单位面积产量.两者相结合,为邢西山区粮食问题的解决创造了有利条件.特别是通过规模宏大的“农业学大寨”运动,促使邢台县西部山区实现了从“糠菜半年粮”到“粮食自给有余”的历史性转变,为改革开放新时期山区建设方针的转变奠定了基础.

邢台县西部山区资源丰富,有着发展多种经营的良好基础,其中尤以经济林特产资源品种居多,具有较高的开发价值.但是受开发条件的限制,在传统时期山区资源长期没有得到有效的开发和利用.集体化时代的邢台县西部山区建设,还比较重视多种经营的发展.其间虽也曾受到“以粮为纲”等政策的影响,但是“*”后期,山区群众的温饱问题解决后,山区建设没有了后顾之忧,山区建设方针实现了从“以粮为纲”到“以林为主”的转变,以林果业为主的多种经营获得了发展空间,邢台县西部山区从此踏上了富裕之路.

水土保持工作是山区生产的生命线.由于乱伐滥砍、毁林毁草、开荒种粮、放牧过度等历史原因,传统时期的邢台县西部山区,森林植被遭到严重破坏,水土流失严重,山区群众深受其害.集体化时代的邢台县西部山区建设,对水土保持工作也进行了积极的探索,先后经历了合作化时期以工程措施为主的沟谷治理、大跃进时期以生物措施为主的大造林、调整时期工程措施和生物措施相结合的综合治理、文化大革命时期山水林田路综合治理和改革开放新时期以小流域为单元的生态经济沟建设等阶段,最终实现了从“光山秃岭”到“山青水秀”的转变,最终走出了一条生态效益、经济效益和社会效益俱佳的蓄水保土之路,影响全国.

靠山吃山,靠山用山,这是无可厚非的.但关键是会吃和会用.集体化时代的邢台县西部山区建设,既经历了各种自然灾害袭击的考验,又遭受过多年“*”路线的干扰破坏.但出于国家不断的调整政策,广大基层干部孜孜不倦的追求和探索,山区群众的艰苦努力和坚持不懈的奋斗,实现了从“糠菜半年粮”到“粮食自给有余”、从“以粮为纲”到“以林为主”、从“光山秃岭”到“山青水秀”三大历史性转变,从根本上改变了邢西山区传统时期“穷山恶水”的面貌,为改革开放新时期影响全国的“太行山道路”的形成奠定了基础.

集体化时代邢台县西部山区三大历史性转变的实现,与集体化时代实行的集体化体制、基层干部的素质、乡村政治结构、艰苦奋斗、自力更生的时代精神具有密切的关系.当前的山区建设应该在山区建设的规划、多种经营的发展、生态环境的保护、基础设施建设、基层干部的培养、自力更生、艰苦奋斗时代精神的发扬等方面给予充分的重视.

第四篇农业学论文范例：新中国农民教育发展研究

农民是社会发展进程中存在的特定群体,弱质性农业特点和历史传承积淀下来的身份定位,与现代社会发展的历史趋向相比较,其滞后性显现无疑,也正因为如此,对其进行教育乃是历史发展的必然要求.从社会变革和历史发展的目标指向而言,其教育的正当性毋庸置疑,而时处“三农”问题*和社会改革发展的关键节点,在“人的发展才是社会根本发展”命题的逻辑框架下,其教育的迫切性又理所当然.

古人云“三十年仁政乃成”,也就是说,治理国家者施行仁政,解决民生问题,三十年是一个可以显示出效果的时间区段.而中国传统的“六十花甲子”更是一个标志成熟的时间,所以在改革开放三十周年和建国六十周年纪念之际,回顾新中国六十年农民教育发展历史,系统整理和分析农民教育发展所取得的成就和积累的经验,总结其教训,揭示其内在的发展规律和演进路径,从理论角度对之加以深入研究,这对如何持续发展农民教育,推进农村改革步伐,具有重要指导和借鉴意义.

本文遵循纵向梳理的历史范式,以新中国农民教育发展的衍进为线索,在对史料的分解和综合之中,提取农民教育事件中的教育因素和显著特征,并努力通过对具有标志性事件的对比,划分新中国农民教育发展的阶段性和总结阶段性特征,形成前后一致且自成逻辑的农民教育发展历史.试图立足于客观立场以思辨性方式评价各阶段农民教育得失,且在系统分析梳理的基础上对新中国六十年农民教育发展的基本特点、基本经验和基本规律做理性分析.本研究分为八章.

第一章:主要阐述了论文的立题背景、研究的目的与意义,综述了国内外农民教育研究状况,说明了论文研究的难点和可能的创新之处,并界定农民教育相关概念.开宗明义,表达研究的基本思路.

第二章立足于近代社会奠定的农民教育基础以及农民教育概念的初步形成.中国古代农民教育体现在职业教育方面所占比例不高,而在政治教育和道德教育方面则更多的是在于维护社会稳定和实行道德教化.20世纪30年代,受西方农民教育思潮兴起的影响,在中国农村大地上掀起一场以改良农村、建设农村为宗旨的乡村建设运动.作为近代中国先进知识分子代表的乡村建设派,他们的可贵之处就在于从致力于农民现代化和农村社会*化的角度从事农民教育培训,开展乡村建设运动.

第三章:农民文化扫盲教育和思想改造运动.以扫盲识字运动为切入点,分析该运动中的农民教育成效,立足于社会主义三大改造的历史背景,从“严重的问题在于教育农民”的论断中分析*农民教育思想的历史渊源和内在价值,力求探讨在大的社会变革之中社会改造、人的改造与农民教育的相互关系,并在农民利益、土地制度变迁与文化逻辑视野下去研究农民心理和农民教育.

第四章分析社会主义建设和探索时期的农民政治教育.在人民公社组织体制下农民教育面临着教育与被教育、理想追寻与现实困境的冲突,农民教育经历了“*思想”学习运动、“四清运动”、知识青年下乡运动等历史阶段,“农业学大寨”时期大寨精神中蕴含着集体主义的理想寄托,科技要素、农民力量和合作逻辑是其明显的特点,这一时期农民教育的制度惯性和教育困境是探索过程中的深层次考量要素.

第五章涉及到改革开放初期的农民技能培训教育和职业教育.以家庭联产承包责任制的推行为历史起点,在社会转型的历史背景之下,农民教育工作在改革初期面临着新的发展机遇.从农民技能培训的各种类型入手,着重分析农业广播电视学校系统在农民教育工作中的地位、功能和作用,对电视媒体在农民教育工作中的作用进行重新评估和审视.立足于经济结构调整和市场经济体制不断完善的历史背景之下,分析计划经济、市场导向和农民利益诱致之间的关系,阐述市场导向下农民经营管理素质培育的历史必然性,与此同时,农民工进城务工的客观状况也敦促在理论上必须对城市化过程中的农民教育、职业转换和身份更替的关系做出回答.在借鉴国外职业教育体系建构的基础上上,对目前农民职业教育体系的建立做系统的概括.

第六章论述新时期农民素质教育新的发展.“三农问题”是个由来已久的历史问题,有着极其深刻的社会背景和历史因素,农民教育无疑是解决其现实困境的有效方法之一,在社会主义新农村建设的历史背景下,论证剩余劳动力转移、新型农民培育和农民市民化的内在逻辑关系,并探讨新型农民的“现代性”价值取向和农民素质结构的内在要素,从社会和谐角度出发,讨论农民教育与农村和谐社会建设的关系,公民社会视野中的农民教育更多的是一个在民生问题有效解决基础上的文化问题,农民民生问题、农村社会稳定和农民教育三者之间有着不可分割的密切关系.

第七章在前六章的基础上,系统回顾新中国的农民教育发展历程,在各个历史阶段的对比和总结中试图总结新中国农民教育发展的基本特点、基本经验和基本规律.基本特点是教育内容不断变化,教育理念循序衍进,教育手段趋向多样,教育对象范围扩大.从国民特性视角、发展路径视角和教育本质视角分别总结农民教育发展的基本经验.新中国六十年农民教育发展规律的总结主要从四个角度进行:从职业教育、全面教育到国民教育是一个目标递进的演化过程,农民教育是在“政府失灵”和“市场失灵”的命题博弈中施教主体的角色调整和定位的历史,农民教育的过程就是各种施教主体参与、赋权与退出的博弈过程,立足于利益逻辑的角度,着重探讨农民教育历史中内在诉求、外部推动和历史契机三者之间的关系,从比较视野中分析后发劣势、后发优势和农民教育发展的路径选择.

第八章分析目前农民教育过程中的体制性障碍和结构性问题,并从现实角度分析了农民教育工作目前存在的挑战,并从层次、模式、内容和方法四个维度分析农民教育的创新路径.立足于整个国家的现代化进程和改革历史的角度,从现代化路径、改革模式的角度来认识“三农”问题和农民教育问题,进行农民教育体制改革和综合治理,健全合理的农民教育制度,从根本上确保农民教育改革顺利推进.

第五篇农业学论文范文格式：猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白4调控IFN-β转录机制的研究

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种高度传染性疫病,是危害养猪业的主要疫病之一.PRRSV至少可编码产生13个非结构蛋白,其中NSP1、NSP2、NSP4、NSP11能够抑制Ⅰ型干扰素的表达.PRRSV NSP4位于ppla蛋白中,共编码204个氨基酸,分子量约为21kDa,具有3C样丝氨酸蛋白酶活性(3C-like serine proteinase,3CLSP),是PRRSV增殖过程中重要的蛋白酶,但有关PRRSV NSP4抑制Ⅰ型干扰素的机制目前尚未可知.本研究分别从IFN-β转录启动通路及NSP4与宿主细胞蛋白互作角度分析探讨NSP4抑制IFN-β表达的分子机制；并应用双荧光素报告系统、激光共聚焦技术及定点突变技术比较分析不同致病性PRRSV毒株NSP4蛋白抑制IFN-β转录差异的分子基础；同时,利用蛋白质组学技术分析NSP4蛋白表达对MARC-145细胞蛋白表达谱的影响,为PRRSV与宿主细胞互作研究提供数据信息,也为PRRSV分子致病机制的深入解析奠定基础.

应用双荧光素酶报告系统分析不同致病性PRRSV毒株NSP4蛋白对IFN-β、IRF3和NF-κB等转录的影响.结果显示,低致病性毒株HB-1/3.9的NSP4对IFN-β的转录及相应的IRF3和NF-κB启动转录的抑制能力均弱于高致病性毒株JXwn06NSP4,统计学分析差异显著.对GenBank收录的45株PRRSV NSP4蛋白序列比对后发现,高、低致病性毒株的NSP4蛋白在其第76和155位氨基酸位点处存在差异(V76A/P, K155A/T).遂利用定点突变技术,突变NSP4的差异位点,经荧光素酶报告质粒、NSP4表达质粒及内参质粒共转染MARC-145细胞,分析点突变后NSP4蛋白抑制IFN-β转录能力的差异.结果显示,位于第二个铰链区(Aa154-156)和核定位信号区域(Aa145-168)的第155位氨基酸位点T→K的突变能够显著降低宿主细胞内IFN-β的转录,是不同致病性PRRSV毒株NSP4抑制Ⅰ型干扰素转录差异的关键位点.

运用双荧光素酶报告系统进一步证实,NSP4对IFN-P转录的抑制作用主要是通过其对IRF3和NF-κB通路活化的抑制而实现的,其中对NF-κB通路活化的抑制作用更为明显.激光共聚焦和Western Blotting结果显示,NSP4蛋白对NF-κB p65蛋白的核定位和磷酸化过程无影响,提示NSP4对NF-κB通路的细胞质阶段无影响.利用定点突变技术结合激光共聚焦、双荧光素酶报告系统分析NSP4的核定位性与其IFN-β转录抑制能力的相关性,结果显示缺失核定位信号区的NSP4在丧失核定位性的同时也丧失了其对IFN-β转录的抑制活性；添加核定位信号后,NSP4蛋白细胞核分布比例上升,同时抑制IFN-β转录的能力增强.研究结果提示,NSP4主要通过抑制NF-κB的活化抑制IFN-β的转录,且抑制效率与该蛋白在细胞核中的分布率呈正相关.

在建立稳定表达高致病性PRRSV毒株JXwn06及低致病性PRRSV毒株HB-1/3.9NSP4蛋白的MARC-145细胞基础上,应用AP-MS(亲和纯化和质谱鉴定联用)技术从蛋白质相互作用的角度分析了NSP4抑制IFN-P转录的分子基础.共筛选到9个可以与NSP4发生相互作用的宿主蛋白,其中2个蛋白可能与调节干扰素表达相关.通过RNA干扰和双荧光素酶报告技术对其中NONO蛋白的作用机制进行分析,结果显示,干扰NONO蛋白的表达能够’下调polyIC激活的IFN-β转录水平,但对NSP4抑制IFN-β转录的过程无影响.表明NSP4并非通过与NONO蛋白相互作用而抑制IFN-β的转录.

运用2D DiGE(荧光差异双向电泳)技术分析了表达不同致病性PRRSV NSP4蛋白的MARC-145细胞蛋白表达谱的差异,蛋白质组学分析结果显示,与对照组MARC-145细胞相比,表达HB-1/3.9NSP4的MARC-145细胞有33个蛋白点呈现差异表达；表达JXwn06NSP4的MARC-145细胞有27个蛋白点呈现差异表达,两者间共有6个蛋白点存在差异表达.研究结果表明,病毒NSP4蛋白的表达对宿主细胞蛋白质表达谱具有影响,且不同致病性毒株NSP4蛋白对宿主细胞蛋白质表达谱的影响存在差异,这些差异表达的蛋白与NSP4抑制干扰素转录机制的相关性还有待于进一步研究.

综上所述,PRRSV NSP4主要通过抑制NF-κB通路活化’下调IFN-β转录,且对IFN-β转录的抑制效率与蛋白的核内分布率呈正相关；第155位氨基酸位点是导致不同致病性PRRSV毒株NSP4对IFN-β转录抑制效率差异的关键位点.

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